Rnase A
Is polaipeiptíd aon-shnáithe é Ribonuclease A (RNAseA) ina bhfuil 4 nasc déshilfíde le meáchan móilíneach de thart ar 13.7 kDa.Is endoribonuclease é RNase A a dhíghrádaíonn go sonrach RNA aonshnáithe ag iarmhair C agus U.Go sonrach, aithníonn an scoilteacht an nasc fosfadiester atá déanta ag an 5′-ribose de núicléatíd agus an grúpa fosfáit ar an 3′-ribose den núicléitíd pirimidín cóngarach, ionas go ndéantar na fosfáití 2, 3′-timthriallach a hidrealú go dtí an 3 comhfhreagrach. ′fosfáití nucleoside (m.sh. tá pG-pG-pC-pA-pG scoilte ag RNase A chun pG-pG-pCp agus A-PG a ghiniúint).Is é RNase A an ceann is gníomhaí chun RNA aonshnáithe a scoilt.Is é an tiúchan oibre a mholtar ná 1-100μG/mL, ag luí le córais imoibrithe éagsúla.Is féidir tiúchan salainn íseal (0-100 mM NaCl) a úsáid chun slabhraí RNA aon-shnáithe, RNA dúbailte-snáithe, agus RNA a dhéantar trí hibridiú RNA-DNA a ghearradh.Ag tiúchan ard salainn (≥0.3 M), áfach, ní scoilteann RNase A ach go sonrach RNA aonshnáithe.
RNase A is coitianta a úsáidtear chun RNA a bhaint le linn ullmhú DNA plasmid nó DNA genomic. Cibé an bhfuil nó nach bhfuil DNase gníomhach le linn an phróisis ullmhúcháin is féidir tionchar go héasca ar an imoibriú.Is féidir an modh traidisiúnta fiuchphointe i ndabhach uisce a úsáid chun gníomhaíocht DNase a dhíghníomhachtú.Níl DNase agus protease sa táirge seo, agus ní gá cóireáil teasa roimh úsáid.Ina theannta sin, is féidir an táirge seo a úsáid freisin i dturgnaimh bhitheolaíocht mhóilíneach cosúil le hanailís cosanta RNase agus anailís seicheamh RNA.
Coinníollacha Stórála
Is féidir an táirge a stóráil ag -25 ～-15 ℃, bailí ar feadh 2 bhliain.
Treoracha
Is é seo ceann de na modhanna coitianta chun réiteach stórála RNase A a ullmhú.Is féidir é a ullmhú freisin trímodhanna eile de réir na modhanna traidisiúnta sa tsaotharlann nó sa litríocht tagartha (mar shamplaag tuaslagadh go díreach i dtuaslagán 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 nó Tris-NaCl)
1. Úsáid aicéatáit sóidiam 10 mM (pH 5.2) chun 10 mg/mL de thuaslagán stórála RNase A a ullmhú
2. Téamh ag 100 ℃ ar feadh 15 min
3. Fuaraigh go teocht an tseomra, cuir 1/10 toirt de 1 M Tris-HCl (pH 7.4), coigeartaigh a pH go 7.4 (domar shampla, cuir 500 ml de thuaslagán stórála RNase 10g/ml 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. Fo-phacáistithe ag -20 ℃ le haghaidh stórála reoite, is féidir a bheith cobhsaí ar feadh suas le 2 bhliain.
[Nótaí]: Nuair a bhíonn tuaslagán RNAseA á fhiuchadh faoi choinníollacha neodracha, foirmeofar deascadh RNase;Boil sé ag pH níos ísle, agus má tá deascadh ann, is féidir é a thabhairt faoi deara, rud a d'fhéadfadh a bheith mar gheall ar láithreacht neamhíonachtaí próitéine.Má aimsítear dríodar tar éis fiuchphointe, is féidir neamhíonachtaí a bhaint trí lártheifneoiriú ardluais (13000rpm), agus ansin iad a fhophacáil le haghaidh stórála reo.
Faisnéis táirge
| Comhchiallaigh | Ribonuclease I;Ribonuclease pancreatach;Ribonuclease 3'-pirimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS Uimh. | 9001-99-4 |
| Dealramh | Púdar bán lyophilized |
| Meáchan móilíneach | ~ 13.7kDa (seicheamh aimínaigéad) |
| Luach Ph | 7.6 (raon gníomhaíochta 6-10) |
| Teocht Oiriúnach | 60 ℃ (Raon gníomhaíochta 15-70 ℃) |
| Gníomhaire gníomhachtaithe | Na2+.K+ |
| Cosc | Rnase Inhibitor |
| Modh díghníomhaithe | Ní féidir é a dhíghníomhachtú trí théamh, moltar colún lártheifneora a úsáid |
| Bunús | Bólachta |
| Tuaslagthacht | Intuaslagtha in uisce (10mg/ml) |
| Caillteanas ar tirim | ≤5.0% |
| Gníomhaíocht einsím | ≥60 aonad Kunitz/mg |
| Pointe isealeictreach | 9.6 |
Nótaí
Ar mhaithe le do shábháilteacht agus do shláinte, caith cótaí saotharlainne agus lámhainní indiúscartha le haghaidh oibriú.
