Rnase A
Is polaipíd aonshnáithe é Ribonuclease A(RNAseA) ina bhfuil 4 nasc déshilfíde a bhfuil meáchan móilíneach timpeall 13.7 kDa aige.RNase Is endoribonuclease é a dhíghrádaíonn go sonrach RNA aonshnáithe ag iarmhair C agus U.Go sonrach, aithníonn an scoilteacht an banna fosfadiester déanta ag an 5'-ribose de núicléitíd agus an grúpa fosfáit ar an 3'-ribose den núicléatíd pirimidín cóngarach, ionas go mbeidh na fosfáití 2,3'-timthriallach hidrealú go dtí an 3 comhfhreagrach. 'fosfáití nucleoside (m.sh., tá pG-pG-pC-pA-pG scoilte ag RNase A chun pG-pG-pCp agus A-PG a ghiniúint).Is é RNase A an ceann is gníomhaí chun RNA aonshnáithe a scoilt.Is é an tiúchan oibre a mholtar ná 1-100 μ G/mL, ag luí le córais imoibrithe éagsúla.Is féidir tiúchan salainn íseal (0-100 mM NaCl) a úsáid chun slabhraí RNA aon-shnáithe, RNA dúbailte-snáithe, agus RNA a dhéantar trí hibridiú RNA-DNA a ghearradh.
Ag tiúchan ard salainn (≥0.3 M), áfach, ní scoilteann RNase A ach go sonrach RNA aonshnáithe.
Úsáidtear RNase A go coitianta chun RNA a bhaint le linn DNA plasmid nó DNA genomic a ullmhú.Cibé an bhfuil nó nach bhfuil DNase gníomhach le linn an phróisis ullmhúcháin is féidir leis tionchar a imirt ar an imoibriú go héasca.Is féidir an modh traidisiúnta fiuchphointe i ndabhach uisce a úsáid chun gníomhaíocht DNase a dhíghníomhachtú.Níl DNase agus protease sa táirge seo, agus ní gá cóireáil teasa roimh úsáid.Ina theannta sin, is féidir an táirge seo a úsáid freisin i dturgnaimh bhitheolaíocht mhóilíneach cosúil le hanailís cosanta RNase agus anailís seicheamh RNA.
Coinníollacha stórála
Ba chóir an táirge a stóráil ag -25 ℃ ~ - 15 ℃ ar feadh 2 bhliain.
Sonraíochtaí
Dealramh | Púdar |
Cainníocht | 100mg / 1g |
Cineál táirge | RNase A |
Treoracha
Is é seo ceann de na modhanna coitianta chun réiteach stórála RNase A a ullmhú.Is féidir é a ullmhú freisintrí mhodhanna eile de réir na modhanna traidisiúnta sa tsaotharlann nó sa litríocht thagartha (amhailag tuaslagadh go díreach i dtuaslagán 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 nó Tris-NaCl)
1. Úsáid aicéatáit sóidiam 10 mM (pH 5.2) chun 10 mg/mL de thuaslagán stórála RNase A a ullmhú.
2. Téamh ag 100 ℃ ar feadh 15 min.
3. Fuaraigh go teocht an tseomra, cuir 1/10 toirt de 1 M Tris-HCl (pH 7.4), coigeartaigh a pH go 7.4 (doMar shampla, cuir 500 mL de thuaslagán stórála RNase 10 mg/mL 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Fo-phacáistithe ag -20 ℃ le haghaidh stórála reoite, is féidir a bheith cobhsaí ar feadh suas le 2 bhliain.
[Nótaí]:
Agus tuaslagán RNaseA á fhiuchadh faoi choinníollacha neodracha, foirmeoidh deascadh RNase;Boil sé ag pH níos ísle, agus má tá deascadh ann, is féidir é a thabhairt faoi deara, rud a d'fhéadfadh a bheith mar gheall ar láithreacht neamhíonachtaí próitéine.Má aimsítear dríodar tar éis fiuchphointe, is féidir neamhíonachtaí a bhaint trí lártheifneoiriú ardluais (13000rpm), agus ansin iad a fho-phacáil le haghaidh stórála reo.
Nótaí
Caith an TCP is gá, le do thoil, a leithéid de chóta saotharlainne agus lámhainní, chun do shláinte agus do shábháilteacht a chinntiú.