5×Neoscript Fast RT-qPCR Premix móide-UNG

Uimhir Chait: HCB5142A

Is meascán an-chobhsaí aon-feadán-bhunaithe probe-bhunaithe é Neoscript Fast RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) atá oiriúnach do thrascríobh droim ar ais aon-chéim agus PCR cainníochtúil (qRT-PCR).Tacaíonn sé le réamh-mheascadh primers agus tóireadóirí agus fanann sé cobhsaí tar éis stórála fada ag teocht íseal.Is féidir an sampla atá le tástáil a chur leis go díreach agus é á úsáid, gan oscailt feadán breise / oibriú píobaireachta.Soláthraíonn an táirge seo comhpháirteanna, m.sh. polymerase DNA te-túsaithe, M-MLV, glycosylase DNA uracil teas-labile (TS-UNG), Inhibitor RNase, MgCl₂, dNTPs (le dUTP in ionad dTTP), agus cobhsaitheoirí.Leis an transcriptase droim ar ais aimpliú tapa géinmhodhnaithe agus DNA polymerase, is féidir an t-aimpliú PCR a chríochnú laistigh de 20-40 nóiméad.Úsáideann an t-imoibrí seo maolán speisialta le haghaidh qPCR le heinsímí measctha einsím aimpliúcháin frith-chosc agus einsím UNG.Mar sin, féadann sé aimpliú maith ar spriocghéine a fháil agus cosc ​​a chur ar aimpliú bréagach de bharr truaillithe iarmharach PCR agus aerasóil.Tá an t-imoibrí seo ag luí leis an chuid is mó d'ionstraimí PCR cainníochtúla fluaraiseachta ó mhonaróirí ar nós Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad agus Roche.

Comhpháirt

1.25×Neoscript Fast RTase/UNG Mix

2.Maolán Premix Fast RT Neoscript (dUTP)

Coinníollacha Stórála

Ba cheart na comhpháirteanna go léir a choinneáil ag -20 ℃ le haghaidh stórála fadtéarmach agus 4 ℃ ar feadh suas le 3 mhí.Measc go maith tar éis leá agus lártheifneoir roimh úsáid.Seachain reo-leá go minic.

Ullmhúchán Córas Imoibrithe qRT-PCR

1) a.Is é an tiúchan deiridh de primer de ghnáth 0.2μM.Le haghaidh torthaí níos fearr, is féidir an tiúchan primer a uasmhéadú laistigh den raon 0.2-1μM.Go ginearálta, is féidir an tiúchan probe a uasmhéadú laistigh den raon 0.1-0.3μM.

2) b.Nuair a bhíonn Nós Imeachta PCR tapa á úsáid, d'fhéadfadh torthaí aimplithe níos fearr a bheith mar thoradh ar thiúchan na primers agus na tóireoirí a mhéadú, agus ba cheart a gcóimheas a uasmhéadú dá réir sin.

3) Tá cineálacha éagsúla samplaí ann go bhfuil cineálacha éagsúla agus ábhar inhibitor agus líon cóip na sprice géine.Ba cheart méid an tsampla a mheas de réir riocht iarbhír.Déan an sampla a chaolú le huisce saor ó núicléas nó le Maolán TE, más gá.

Imoibriú Ccoinníollacha

Rialú Cáilíochta

1.Brath feidhme: íogaireacht, sainiúlacht agus atrialltacht qPCR.

2.Gan aon ghníomhaíocht nuclease exogenous: gan aon truailliú endonuclease exogenous agus exonuclease.

Nótaí

1.Níl an ráta aimplithe de pholaiméiráis DNA gasta níos lú ná 1kb/10s.Tá luasanna téimh agus fuaraithe difriúla ag ionstraimí PCR éagsúla, modhanna rialaithe teochta agus seoltacht theirmeach, agus mar sin tá sé riachtanach do mhodh comhchruinnithe agus rith primer / probe a uasmhéadú i gcomhar le d'ionstraim PCR tapa ar leith.

2.Feidhmíonn an táirge seo infheidhmeacht leathan, agus tá sé oiriúnach le haghaidh diagnóis mhóilíneach ard-íogaireachta.Moltar modh PCR trí chéim le haghaidh primers le teocht anáil íseal nó le haghaidh aimpliú blúirí fada os cionn 200 bp.

3 .Ós rud é go bhfuil éifeachtacht úsáide difriúil dUTP ag aimplicáin éagsúla agus íogaireacht dhifriúil do UNG, ba cheart na himoibrithe a bharrfheabhsú má laghdaíonn an íogaireacht braite agus córas UNG á úsáid.Déan teagmháil linn le do thoil le haghaidh tacaíocht theicniúil más gá.

4.Chun aimpliú táirgí PCR tugtha anonn a sheachaint, tá gá le limistéar turgnamhach tiomnaithe agus pípéad le haghaidh aimplithe.Oibriú le lámhainní agus athraigh go minic agus ná oscail an feadán PCR tar éis aimplithe.