Ilphléacs Céim a hAon RT-qPCR Premix-UNG
Uimhir Chait: HCB5145A
Is trealamh ilphléacs PCR cainníochtúil ilphléacs RT-qPCR Probe (UDG Plus) atá bunaithe ar RNA mar theimpléad.I bpróiseas an turgnaimh, rinneadh trascríobh droim ar ais agus PCR cainníochtúil sa fheadán céanna, rud a shimpliú an oibríocht thurgnamhach agus laghdaigh an baol éillithe.Sa trealamh seo, rinneadh an chéad snáithe cDNA a shintéisiú go héifeachtach le Reverse Transcriptase teas-dhíonach agus a mhéadú go cainníochtúil le HotStart Tag DNA Polymerase.Is éard atá sa trealamh go príomha maolán MP optamaithe, meascán einsímí, etc. Tá Mg sa tuaslagán maolánach cheana féin2+agus dNTP.Ina theannta sin, cuirtear leis na fachtóirí a d'fhéadfadh bac a chur go héifeachtach ar aimpliú PCR neamh-shonrach agus feabhas a chur ar éifeachtúlacht aimplithe imoibrithe il qPCR, rud a d'fhéadfadh éifeachtacht aimpliúcháin a chinntiú agus imoibriú aimpliúcháin iolrach a dhéanamh.Cuireadh an córas duTP/UDG leis chun an baol éillithe aerasóil a chosc go héifeachtach.
Comhpháirteanna
1. Maolán
2. Meascán Einsím
Sonraíocht
| Tús te | Tógtha-i tús te |
| Modh braite | Aimsiú primer-probe |
| Modh PCR | Céim amháin RT-qPCR |
| Polaiméaráis | Taq DNA polaiméire |
| Cineál sampla | DNA |
Coinníollacha Stórála
Seoltar an táirge le oighear tirim agus is féidir é a stóráil ag -25 ~ -15 ℃ ar feadh 1 bhliain.Ba chóir a sheachaint go minicreo-leá.Moltar a shábháil ar leithligh.
Treoracha
1.Imoibriú Córas
| Comhpháirteanna | Toirt (μL) | Tiúchan Deiridh |
| 2 × MP Maolán | 12.5 | 1× |
| Meascán Einsím | 1 | - |
| Meascán primer/Probe (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| Teimpléad RNA | 1-10 | - |
| RNase saor in aisce H2O | go dtí 25 | - |
Nótaí:
Bí cinnte a mheascadh go maith roimh úsáid, a sheachaint boilgeoga iomarcacha de bharr creathadh foréigneach.
a.Tiúchan primer: Meascán primer lena n-áirítear primer ilphléacs, ag brath ar an staid tiúchan primer optamach b'fhéidir idir 0.l agus 1.0μM.
b.Tiúchan taiscéalaithe: Meascán taiscéalaithe lena n-áirítear grúpa fluaraiseachta de dhifríocht lipéadaithe ilphléacs, ag brath ar an gcás b'fhéidir go mbeadh an tiúchan tóireadóirí is fearr idir 0.05 agus 0.5μM.
c.Caolú teimpléid: Tá qPCR an-íogair agus moltar an teimpléad a chaolú.Tá an luach Ct rialaithe oiriúnach idir 20 agus 35.
d.Ullmhúchán córais: Ullmhaigh le do thoil sa tábla oibre ultra glan, agus píobaire agus feadán imoibrithe gan iarmhar nuclease;tá sé molta a bhaint as an ceann gunna le eilimint scagaire.Seachain tras-éilliú agus éilliú aerasóil.
2. Rothaíocht OptamaithePrótacal
| Rothaíocht céim | Teocht. | Am | Timthriallta |
| Trascríobh droim ar ais | 50 ℃a | 20 nóiméad | 1 |
| Dínádúrú tosaigh | 95 ℃ | 5 nóiméad | 1 |
| Imoibriú aimpliúcháin | 95 ℃ | 15 soicind |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30 soicind c |
Nótaí:
a.Trascríobh droim ar ais: Is féidir leis an teocht 42°C nó 50°C a roghnú.
b.Imoibriú aimpliúcháin: Coigeartaítear an teocht de réir luach Tm na bpriméirí deartha.
c.Fáil comhartha fluaraiseachta: Socraigh an nós imeachta turgnamhach de réir riachtanais lámhleabhar na hionstraime.
Nótaí
Caith an TCP riachtanach le do thoil, mar chóta saotharlainne agus lámhainní, chun do shláinte agus do shábháilteacht a chinntiú.
