DNase I (Rnase Free)(5u/ul)
Cat Uimh: HC4007A
Is endodeoxyribonuclease é DNase I (Déoxyribonuclease I) atá in ann DNA aonshnáithe nó dhá shnáithe a díolama.Aithníonn sé agus scoilteann sé bannaí fosfadiester chun monai-ocsa-núicléatídí nó oligodeocsa-núicléatídí aonshnáithe nó dúbailte a tháirgeadh le grúpaí fosfáit ag an gcríochfort 5' agus hiodrocsaile ag an gcríochfort 3'.Braitheann gníomhaíocht DNase I ar Ca2+agus is féidir iad a ghníomhachtú le hiain mhiotail dhéfhiúsacha mar Mn2+agus Zn2+.5 mM Ca2+chosnaíonn an einsím ó hidrealú.I láthair Mg2+, d'fhéadfadh an einsím suíomh ar bith ar aon snáithe DNA a aithint agus a scoilt go randamach.I láthair Mn2+, is féidir na snáitheanna dúbailte DNA a aithint go comhuaineach agus a scoilteadh ag beagnach an suíomh céanna chun blúirí DNA deireadh cothrom nó blúirí DNA deireadh greamaitheacha a dhéanamh le 1-2 núicléatídí ag brú amach.
Comhpháirteanna
| Ainm | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNase I, saor ó RNase | 20μL | 200μL | 1mL | 10 ml |
| 10×DNase I Maolán | 1mL | 1mL | 5 × 1mL | 5 × 10 mL |
Coinníollacha stórála
-25 ℃ ~ -15 ℃ le haghaidh stórála;Iompar faoi phacaí oighir.
Treoracha
1. Ullmhaigh an tuaslagán imoibrithe sa fheadán saor ó RNase de réir na gcoibhneas atá liostaithe thíos:
| Comhpháirt | Toirt |
| RNA | X µg |
| 10 × DNase I Maolán | 1μL |
| DNase I, saor ó RNase(5U/μL) | 1 U in aghaidh µg RNA① |
| ddH2O | Suas le 10 μL |
Nóta: ① Ríomh an toirt DNase I is gá a shuimiú bunaithe ar an méid RNA.
2. 37 ℃ ar feadh 15 nóiméad;
3. Cuir 0.5M EDTA leis an tiúchan deiridh de 2.5mM~5mM, agus teas ag 65 ℃ ar feadh 10 nóiméad chun an t-imoibriú a stopadh.Is féidir an sampla a úsáid go díreach don chéad imoibriú eile ar nós trascríobh droim ar aisturgnamh.
Sainmhíniú ar an Aonad
Sainmhínítear aonad amháin mar an méid einsím a dhíghrádóidh go hiomlán 1µg de pBR322DNA i 10 nóiméad ag 37 ℃.
Rialú Cáilíochta
RNase:Ní thugann 5U de DNase I le 1.6µg MS2 RNA ar feadh 4 huaire ag 37 ℃ aon díghrádú mararna chinneadh ag leictreafóiréis glóthach agarose.
Nótaí
1. Ullmhaigh 0.5MEDTA leat féin le do thoil.
2. Úsáid 1U DNase I in aghaidh µg de RNA.Má tá an RNA níos lú ná 1µg, áfach, bain úsáid as 1U DNase I.
3. Cuir an einsím ar oighear le do thoil le linn oibriú.
