2×PCR Master Mix (gan dath)
Is cineál de réiteach réamh-mheasctha PCR traidisiúnta é PCR Master Mix atá réidh le húsáid, lena n-áirítear Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 agus maolán optamaithe.Le linn an imoibrithe, ní féidir ach an primer agus an teimpléad a chur leis le haghaidh aimplithe, rud a shimplíonn go mór céimeanna oibríochta an turgnaimh.Tá cobhsaitheoirí den scoth sa táirge seo agus is féidir iad a stóráil ar feadh 3 mhí ag 4 ℃.Tá 3′-dA ag an táirge PCR agus is féidir é a chlónáil go héasca i veicteoir T.
Coinníollacha Stórála
Ba chóir an táirge a stóráil ag -25 ℃ ~ -15 ℃ ar feadh dhá bhliain.
Sonraíochtaí
| Dílseacht (vs.Taq) | 1× |
| Tús te | No |
| Crochadh thall | 3′-A |
| Polaiméaráis | Polaiméaráis DNA Taq |
| Formáid Imoibrithe | SuperMix nó Master Mix |
| Luas Imoibrithe | Caighdeán |
| Cineál Táirge | Máistirmheascán PCR (2×) |
Treoracha
1.Córas Imoibrithe
| Comhpháirteanna | Méid (μL) |
| DNA teimpléad | Oiriúnach |
| primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Máistir meascán PCR | 25 |
| ddH2O | Go dtí 50 |
2.Prótacal Aimpliúcháin
| Céimeanna rothaíochta | Teocht (°C) | Am | Timthriallta |
| Réamh-dhínádúrú | 94 ℃ | 5 nóiméad | 1 |
| Dínádúrú | 94 ℃ | 30 soic | 35 |
| Annealing | 50-60 ℃ | 30 soic | |
| Síneadh | 72 ℃ | 30-60 soicind/kb | |
| Síneadh Deiridh | 72 ℃ | 10 nóiméad | 1 |
Nótaí:
1) Úsáid teimpléad: 50-200 ng genomic DNA;0.1-10 ng DNA plasmid.
2) Mg2+tiúchan: Tá 3 mM de MgCl2 sa táirge seo atá oiriúnach don chuid is mó d’imoibrithe PCR.
3) Teocht annealing: Déan tagairt le do thoil do luach Tm teoiriciúil Primers.Is féidir an teocht annealing a shocrú go 2-5 ℃ níos ísle ná luach teoiriciúil an primer.
4) Am sínte: Le haghaidh aitheantais mhóilíneach, moltar 30 sec/kb.Le haghaidh clónáil géine, 60sec/kb molta.
Nótaí
1.Ar mhaithe le do shábháilteacht agus do shláinte, caith cótaí saotharlainne agus lámhainní indiúscartha le haghaidh oibriú.
2.Le húsáid taighde amháin!
