Céim a hAon RT-qPCR SYBR Green Premix
Cat Uimh: HCB5140A
One Step RT-qPCR Tá Syber Green Premix le haghaidh cainníochtú fluaraiseachta bunaithe ar lí SYBR Green I.Ag baint úsáide as primers géine-shonracha, cuirtear tras-scríobh droim ar ais agus imoibrithe qPCR i gcrích in aon fheadán amháin, rud a chuireann deireadh leis an ngá atá le hathoscailt caipín agus oibríochtaí pípéadaithe, ag feabhsú go mór éifeachtúlacht measúnachta agus ag laghdú an baol éillithe.I gcás samplaí RNA, úsáideann an trealamh Reverse Transcriptase teas-resistant do shintéis éifeachtach cDNA agus HotStart Taq DNA Polymerase le haghaidh aimpliú cainníochtúil.Faoin gcóras maolánach optamaithe, is féidir le híogaireacht an trealaimh a bheith chomh hard le 0.1 pg do spriocanna ardléirithe agus chomh hard le 1 lch i gcás spriocanna measartha sainráite.Tá an trealamh oiriúnach chun samplaí DNA a aimpliú agus a chainníochtú.Cuireann sé ar chumas aigéid núicléacha a bhrath agus a chainníochtú go híogair ó shamplaí éagsúla plandaí agus ainmhithe, cealla agus miocrorgánaigh.
Comhpháirteanna
No | Ainm | Toirt | Toirt |
1 | Maolán Casta | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
2 | Ard-Mheascán einsím | 20 μL | 200 μL |
3 | RNase saor in aisce H2O | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
Coinníollacha Stórála
Ba cheart an táirge seo a stóráil ag -25 ~ -15 ℃ ar shiúl ón solas ar feadh 1 bhliain.
Treoracha
Cumraíocht an chórais 1.Reactiond
Comhpháirteanna | Toirt (μL) | Toirt (μL) | Tiúchan deiridh |
Maolán Casta | 12.5 | 25 | 1× |
Ard-Mheascán einsím | 1 | 2 | - |
Ar Aghaidh Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
Cúil tosaigh (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
Teimpléad RNAb | X | X | - |
RNase saor in aisce H2Oc | go dtí 25 | go 50 | - |
Nótaí:
1) a.TBa é an tiúchan deiridh primer ná 0.2 μmol/L, a d'fhéadfaí a choigeartú freisin idir 0.1 agus 1μmol/L de réir mar is cuí.
2) b.Tá an t-imoibrí thar a bheith íogair, le Iomlán RNA sa raon 1pg-1μg, agus léirigh tástáil ar shamplaí daonna ionchur optamach de 1 pg-100 ng, ag rialú le haghaidh luach Ct iomlán sa raon 15-30 mar is cuí.
3) c.Moltar 20μL nó 50μL a úsáid chun bailíocht agus in-atáirgtheacht an aimplithe géine sprice a chinntiú.
4) d.Ullmhaigh le do thoil sa bhinse ultra-ghlan agus úsáid leideanna saor ó iarmhar nuclease agus feadáin imoibrithe;moltar leideanna le cartúis scagaire.Seachain tras-éilliú agus éilliú aerasóil.
2.Clár imoibrithe
Céim rothaíochta | Teocht. | Am | Timthriallta |
Trascríobh droim ar ais | 50 ℃a | 6 nóiméad | 1 |
Dínádúrú tosaigh | 95 ℃ | 5 nóiméad | 1 |
Imoibriú aimpliúcháin | 95 ℃ | 15 soic | 40 |
60 ℃b | 30 soic | ||
Céim cuar leá | Réamhshocrú Ionstraim | 1 |
Nótaí:
1) a.Is féidir an teocht trascríobh droim ar ais a roghnú idir 50-55 ° C de réir na riachtanas turgnamhacha.I gcás samplaí DNA, is féidir an próiseas trascríobh droim ar ais a fhágáil ar lár.
2) b.I gcásanna speisialta is féidir an teocht annealing / síneadh a choigeartú de réir an luach primer Tm, moltar 60 ° C.
Nótaí
1. Tá an táirge seo le haghaidh úsáide taighde amháin.
2. Oibrigh le do thoil le cótaí saotharlainne agus lámhainní indiúscartha, ar mhaithe le do shábháilteacht.