Rnase Inhibitor (saor ó ghliocról)
Is inhibitor murine RNase inhibitor RNase murine athchuingreach sainráite agus íonaithe ó E.coli.Ceanglaíonn sé le RNase A, B nó C i gcóimheas 1:1 trí nascáil neamhchomhfhiúsach, rud a chuireann bac ar ghníomhaíocht na dtrí einsím agus ag cosaint RNA ó dhíghrádú.Mar sin féin, Níl sé éifeachtach i gcoinne RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H nó RNase ó Aspergillus.Rinne RT-PCR, RT-qPCR agus IVT mRNA an t-inhibitor RNase Murine a thástáil, agus bhí sé ag luí le tras-scríbhinní éagsúla droim ar ais, polaiméirí DNA agus polaiméirí RNA.
I gcomparáid le coscairí RNase daonna, níl dhá chistéin in inhibitor RNase murine atá an-íogair d'ocsaídiú rud a fhágann díghníomhú an choscóra.Sin a fhágann go bhfuil sé cobhsaí ag tiúchan íseal DTT (níos lú ná 1 mM).Fágann an ghné seo go bhfuil sé oiriúnach le húsáid in imoibrithe ina bhfuil comhchruinnithe arda DTT díobhálach don imoibriú (eg RT-PCR fíor-ama).
Aiarratas
Is féidir an táirge seo a úsáid go forleathan in aon turgnamh ina bhfuil cur isteach RNase indéanta chun díghrádú RNA a sheachaint, mar shampla:
sintéis cDNA 1.First-snáithe, RT-PCR, RT-qPCR, etc;
2. RNA a chosaint ó dhíghrádú i dtras-scríobh/aistriúchán in vitro (eg macasamhlú víreasach in vitro);
3. Cosc ar ghníomhaíocht RNase le linn aonrú agus íonú RNA.
Coinníollacha Stórála
Stóráil ag -25 ～-15 ℃;
Timthriallta reo-leá ≤ 5 huaire;
Bailí ar feadh 1 bhliain.
Sainmhíniú aonaid
Sainmhínítear aonad amháin mar an méid Coscairí RNase a theastaíonn chun gníomhaíocht 5 ng de RNase A a chosc faoi 50%.
Meáchan móilíneach
Is próitéin 50 kDa é Inhibitor RNase (saor ó ghliocról).
Rialú cáilíochta
Exonuclease Gníomhaíocht:
De bharr gor 40 U den einsím le 1 μg λ-Hind III díleá DNA ar feadh 16 uair an chloig ag 37°C níor tharla aon díghrádú inbhraite ar an DNA mar a chinntear le leictreafóiréis glóthach.
Gníomhaíocht Endonuclease:
Ní raibh aon díghrádú inbhraite ar an DNA mar a chinntear le leictreafóiréis glóthach mar thoradh ar gor 40 U den einsím le 1 μg λ DNA ar feadh 16 huaire an chloig ag 37°C.
Ag cnagadh Gníomhaíocht:
Mar thoradh ar gor 40 U d'einsím le 1 μg pBR322 ar feadh 16 uair an chloig ag 37 ℃ níor tharla aon díghrádú inbhraite ar an DNA mar a chinntear le leictreafóiréis glóthach.
RNase Gníomhaíocht:
Mar thoradh ar gor 40 U d'einsím le 1.6 μg MS2 RNA ar feadh 4 huaire ag 37 ℃ níor tháinig aon díghrádú inbhraite ar an RNA mar a chinntear le leictreafóiréis glóthach.
E.DNA coli:
Braitear 40 U d’Einsím ag TaqMan qPCR.Is é an DNA E.coli ná ≤ 0. 1pg/40U.
Nótas
1. Ná croith nó corraigh go foréigneach chun díghníomhú einsíme a chosc.
Tá coscaire 2.RNase gníomhach ag teochtaí ó 25 ℃ go 55 ℃ agus tá sé díghníomhaithe ag ≥65 ℃.
3. Níl bac ar ghníomhaíocht RNase H, RNase 1, agus RNase T1.
4. Tá an raon pH chun gníomhaíocht RNase a chosc leathan (gníomhach ag pH 5-9), ag taispeáint an ghníomhaíocht uasta ag pH 7-8.
