2×PCR Super Mix (le dath)
Tá 2 × PCR Master Mix ann Taq DNA Polymerase, dNTPs, agus comhpháirteanna eile a bhfuil gá leo le PCR.Tá an Máistir Measc cobhsaí ar feadh 3 mhí ag 4 ℃ lenár cobhsaitheoirí saincheaptha.Tá an réiteach réamh-mheascáin optamaithe le haghaidh PCR traidisiúnta agus réidh le húsáid trí theimpléad DNA agus primers a chur leis.Is féidir na táirgí PCR a luchtú go díreach le haghaidh leictreafóiréis le dath gorm bromophenol réamh-luchtaithe.Tá 3′-dA asbhrú sna táirgí aimplithe agus is féidir iad a chlónáil go héasca i veicteoir T.Déanann an Máistir-Mheascán 2 × PCR nós imeachta PCR a shimpliú agus laghdaítear éilliú.
Coinníollacha Stórála
Ba chóir táirgí a stóráil ag -25 ℃ ~ -15 ℃ ar feadh 2 bhliain.
Sonraíochtaí
Dílseacht(vs.Taq) | 1× |
Tús te | No |
Crochadh thall | 3' -A |
Polaiméaráis | Polaiméaráis DNA Taq |
Formáid Imoibrithe | SuperMix nó Master Mix |
Luas Imoibrithe | Caighdeán |
Cineál Táirge | Máistirmheascán PCR (2x) |
Treoracha
1.Córas Imoibrithe
Comhpháirteanna | Toirt(μL) |
DNA teimpléad | Oiriúnach |
primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
2 × PCR Measc Máistir | 25 |
ddH2O | go 50 |
2.Prótacal Aimpliúcháin
Céimeanna rothaíochta | Teocht (°C) | Am | Timthriallta |
Dínádúrú tosaigh | 94 | 5 nóim | 1 |
Dínádúrú | 94 | 30 soic | 35 |
Annealing | 50-60 | 30 soic | |
Síneadh | 72 | 30-60 soicind/kb | |
Síneadh deiridh | 72 | 10 nóim | 1 |
Nóta:
1) Úsáid teimpléad: 50-200ng genomic DNA;0.1-10ng DNA plasmid.
2) Mg2+tiúchan: Tá 3mM de MgCl2 sa táirge seo, atá oiriúnach don chuid is mó d'imoibrithe PCR.
3) Teocht annealing: Déan tagairt le do thoil do luach Tm teoiriciúil na primers.Is féidir an teocht annealing a shocrú go 2-5 ℃ níos ísle ná luach teoiriciúil an primer.
4) Am síneadh: Le haghaidh aitheantais mhóilíneach, moltar 30 sec/kb.Le haghaidh clónáil géine, moltar 60 sec/kb.
Nótaí
1.Níl táirgí PCR le 2 × PCR Master Mix oiriúnach do leictreafóiréis glóthach polyacrylamide.
2.Ar mhaithe le do shábháilteacht agus do shláinte, caith cótaí saotharlainne agus lámhainní indiúscartha le haghaidh oibriú.
3 .Úsáidtear é le haghaidh úsáide taighde AMHÁIN!