Einsímí UDG/UNG
Is féidir le UDG (glycosylase DNA uracil) hidrealú an naisc N-glycosidic idir an bonn uracil agus an cnámh droma siúcra-fosfáit i ssDNA agus dsDNA a chatalú.Féadann sé truailliú aerasóil a rialú go héasca agus tá sé oiriúnach do chórais bitheolaíochta mhóilíneacha coitianta mar PCR, qPCR, RT-qPCR agus LAMP.
Sonraíochtaí
| Óstach Léirithe | Athchuingreach E. coliwith géine glycosylase uracil DNA |
| Meáchan Móilíneach | 24. 8kDa |
| Íonachta | ≥95% (SDS- LEATHANACH) |
| Díghníomhú Teasa | 95 ℃, 5 ~ 10 nóiméad |
| Sainmhíniú ar an Aonad | Sainmhínítear aonad amháin (U) mar an méid einsím a theastaíonn chun hidrealú l μg dU ina bhfuil dsDNA a chatalú i 30 nóiméad ag 25 ℃. |
Stóráil
Ba chóir an táirge a stóráil ag-25 ℃ ~ -15 ° C ar feadh dhá bhliain.
Treoracha
1.An meascán imoibrithe PCR a ullmhú de réir an chórais seo a leanas
| Comhpháirteanna | Toirt (μL) | Tiúchan deiridh |
| Maolán 10×PCR (Mg²+Móide) | 5 | 1× |
| 25 mmol/LMgCl | 3 | 1.5 mmol/L |
| duTP(10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol/L |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/Leach) | 1 | 0.2 mmol/Leach |
| DNA teimpléad | X | - |
| Primer1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Primer 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Polaiméaráis DNA Taq (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
| Glycosylase DNA Uracil (UDG/UNG), 1 U/μL | 1 | 1 U/μL |
| ddH₂O | Suas le 50 | - |
Nóta: De réir na gceanglas turgnamhacha, is féidir an tiúchan deiridh dUTP a choigeartú idir 0.2-0.6 mmol / L, agus is féidir 0.2 mmol / L dTTP a chur leis go roghnach.
2.Nós imeachta aimpliúcháin
| Céim rothaíochta | Teocht | Am | Timthriallta |
| du-ina bhfuil díghrádú teimpléad | 25 ℃ | 10 nóiméad | 1 |
| Gníomhachtú UDG, dínádúrú tosaigh teimpléad | 95 ℃ | 5 ~ 10 nóiméad | 1 |
| Dínádúrú | 95 ℃ | 10 soic |
30-35 |
| Annealing | 60 ℃ | 20 soic | |
| Síneadh | 72 ℃ | 30 soicind/kb | |
| Síneadh deiridh | 72 ℃ | 5 nóim | 1 |
Nóta: Is féidir an t-am imoibrithe ag 25 ° C a choigeartú laistigh de 5-10 nóiméad de réir na gceanglas turgnamhacha.
Nótaí
1.Tá UDG gníomhach i bhformhór na maoláin imoibrithe PCR.
2.Ba chóir einsímí a stóráil i mbosca oighir nó ar fholcadán oighir nuair a úsáidtear iad, agus ba chóir iad a stóráil ag-20°C díreach tar éis iad a úsáid.
3.Caith an TCP riachtanach, a leithéid de chóta saotharlainne agus lámhainní, le do shláinte agus sábháilteacht a chinntiú!
