Ultra Núicléas
Is éard atá i UltraNuclease ná edendonuclaese go géiniteach a dhíorthaítear ó Serratia marcescens, atá in ann DNA nó RNA a dhíghrádú, bíodh sé snáithe dúbailte nó singil, líneach nó ciorclach faoi raon leathan riochtaí, aigéid núicléacha a dhíghrádú go hiomlán i oligonucleotídí 5'-monafosfáit le fad 3-5bonn. .Tar éis modhnú innealtóireachta géiniteach, rinneadh an táirge a choipeadh, a chur in iúl, agus a íonú i Escherichia coli (E. coli), rud a laghdaíonn slaodacht an tsruthán cille agus taighde neamheolaíoch lysate cille, ach freisin feabhas a chur ar éifeachtúlacht íonú agus taighde feidhme próitéine.Is féidir é a úsáid freisin sa tionscal géinteiripe, íonú víreas, táirgeadh vacsaíní, próitéin agus polaisiúicríd mar imoibrí óstach a bhaint as aigéad núicléach.
Gnéithe Táirge
CAS Uimh. | 9025-65-4 |
CE Uimh. | |
Meáchan Móilíneach | 30kda |
Pointe Iseleictreach | 6.85 |
Próitéin íonachta | ≥99% (SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
Gníomhaíocht Sonrach | ≥1.1×106U/mg |
Teocht is Fearr | 37°C |
pH is fearr | 8.0 |
ProteaseActivity | diúltach |
Bithualach | <10CFU/100,000U |
Próitéin Óstach-chill iarmharach | ≤10ppm |
Miotal trom | ≤10ppm |
Endotoxin Baictéarach | <0.25AE/1000U |
Maolán Stórála | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2, 20mM NaCl , 50% Glicearol |
Coinníollacha stórála
≤0°C iompar ;-25~-15°C Stóráil, bailíocht 2 bhliain (seachain reo-leá).
Sainmhíniú ar an Aonad
Sainmhíníodh an méid einsím a úsáidtear chun luach ionsú △A260 a athrú faoi 1.0 laistigh de 30 nóiméad ag 37 °C, pH 8.0, comhionann le DNA sperm bradán 37μg díleáite trí ghearradh ina oligonucleotides, mar aonad gníomhach (U).
Rialú cáilíochta
Próitéin Óstach-chill iarmharach: trealamh ELISA
•Protease Iarmhair: 250KU/mL D'imoibrigh UltraNuclease le foshraith ar feadh 60 nóiméad, níor aimsíodh aon ghníomhaíocht.
•Endotoxin Baictéarach: LAL-Test, Pharmacopoeia Dhaon-Phoblacht na Síne Imleabhar 4 (Eagrán 2020) modh tástála teorainn glóthach.Rialacha Ginearálta (1143).
•Bithualach: Pharmacopoeia Daon-Phoblacht na Síne Imleabhar 4 (Eagrán 2020)— Ginearálta
Rialacha maidir le Tástáil Steiriliúcháin (1101), Caighdeán Náisiúnta PRC, GB 4789.2-2016.
•Miotal trom:ICP-AES, HJ776-2015.
Oibríocht
Cuireadh bac suntasach ar ghníomhaíocht UltraNuclease nuair a bhí tiúchan SDS os cionn 0.1% nó EDTA
bhí an tiúchan os cionn 1mM. Ní raibh tionchar ar bith ag Surfactant Triton X- 100, Tween 20 agus Tween 80 ar núicléas
airíonna nuair a bhí an tiúchan faoi 1.5%.
Oibríocht | Oibríocht is Fearr | Oibríocht Bhailí |
Teocht | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2mM | 1- 15mM |
DTT | 0- 100mM | >100mM |
2-Meircapteatánól | 0- 100mM | >100mM |
ian miotail monovalent (Na+, K+ srl.) | 0-20mM | 0-200mM |
PO43- | 0- 10mM | 0- 100mM |
Úsáid agus Dosage
• Aigéad núicléach eisghineach a bhaint de tháirgí vacsaíne, an baol a bhaineann le tocsaineacht aigéid núicléigh iarmharaigh a laghdú agus sábháilteacht táirgí a fheabhsú.
• Laghdaigh slaodacht an leachta beatha de bharr aigéad núicléasach, giorrú an t-am próiseála agus méadaítear táirgeacht próitéine.
• Bain amach an t-aigéad núicléach atá fillte ar an gcáithnín (víreas, corp cuimsithe, etc.), rud a chabhródh
le scaoileadh agus íonú an cháithnín.
Cineál Turgnamhach | Táirgeadh Próitéin | Víreas, vacsaín | Drugaí Cille |
Uimhir Cealla | 1g meáchan fliuch cille (ar athchur le maolán 10ml) | 1L choipeadh leacht supernatant | 1L cultúr |
Dáileog Íosta | 250U | 100U | 100U |
Dosage Molta | 2500U | 25000U | 5000U |
• Is féidir le cóireáil núicléas réiteach agus aisghabháil an tsampla a fheabhsú le haghaidh crómatagrafaíocht colún, leictreafóiréis agus anailís blotála.
• I géinteiripe, baintear aigéad núicléasach chun víris íonaithe a bhaineann le adeno-bhaint a fháil.