Alcaileach Fosphatase (ALP)
Cur síos
Díorthaítear Fosphatase Alcaileach ó phéine athchuingreach E. coli a iompraíonn an ghéin TAB5.Déanann an einsím catalú ar dhífhosfaralú foircinn 5’ agus 3’ de phosphomonoesters DNA agus RNA.Chomh maith leis sin, hidrealaíonn sé ribose, chomh maith le trífhosfáití deocsiribonucleoside (NTPanna agus dNTPanna).Feidhmíonn Fosfatás Alcaileach TAB5 ar fhoircinn 5´ atá ag brúchtadh, 5´ cuasaithe agus maol.Is féidir an Phosphatase a úsáid i go leor feidhmeanna bitheolaíochta móilíneacha, mar chlónáil nó lipéadú deireadh taiscéalaithe chun foircinn fosfarlaithe DNA nó RNA a bhaint.I dturgnaimh chlónála, cuireann dephosphorylation cosc ar an DNA plasmid líneach ó fhéinligation.Is féidir leis dNTPanna neamhchorpraithe a dhíghrádú freisin in imoibrithe PCR chun teimpléad a ullmhú le haghaidh seicheamhú DNA.Díghníomhaítear an einsím go hiomlán agus go dochúlaithe trí théamh ag 70°C ar feadh 5 nóiméad, rud a fhágann nach gá an fosfatase a bhaint roimh ligation nó deireadh a chur leis an lipéadú.
Úsáid
Is féidir le fosfatase 1.alcaileach i dteannta le próitéiní (antasubstaintí, streptavidin srl,) sprioc-mhóilíní a aithint go sonrach, agus is féidir iad a úsáid i bhrath ELISA, WB agus histochemical;
Is féidir 2.alkaline phosphatase a úsáid chun dephosphorize an 5 '-críochfort DNA nó RNA chun cosc a chur féin-nascadh;
3.Is féidir an DNA nó an RNA dephosphorylated thuas a lipéadú le fosfáití raidió-lipéadaithe (trí T4 poly-nucleotide kinase)
Struchtúr Ceimiceach
Sonraíocht
| Míreanna Tástála | Sonraíochtaí |
| Gníomhaíocht Einsím | 5U/μL |
| Gníomhaíocht Endonuclease | Ní braitheadh |
| Gníomhaíocht Exonuuclease | Ní braitheadh |
| Gníomhaíocht Nicking | Ní braitheadh |
| Gníomhaíocht RNase | Ní braitheadh |
| E.coli DNA | ≤1cóip/5U |
| Endotoxin | Tástáil LAL, ≤10EU/mg |
| Íonachta | ≥95% |
Iompar agus stóráil
Iompar:Timpeallachta
Stóráil:Stóráil ag 2-8 ° C
Ath-thástáil moltaSaol:2 bhliain
