Polymerase DNA Bst 2.0 (saor ó ghliocról, ard-dlúis)
Díorthaítear Bst DNA polymerase V2 ó Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, a bhfuil gníomhaíocht DNA polymerase 5′→3′ aige agus gníomhaíocht athsholáthair slabhra láidir, ach gan aon ghníomhaíocht exonuclease 5′→3′.Tá Bst DNA Polymerase V2 thar a bheith oiriúnach do dhíláithriú snáitheanna, LAMP aimplithe isiteirmeach (Aimpliú isiteirmeach trí-Lúb) agus seicheamh tapa.Tá an Bst DNA polymerase V2 seo in ann bac a chur ar ghníomhaíocht DNA polymerase ag teocht an tseomra, ionas gur féidir é a oibriú agus an córas imoibrithe a fhoirmiú ag teocht an tseomra, cosc a chur ar aimpliú neamh-shonrach agus feabhas a chur ar éifeachtúlacht an imoibrithe, agus is féidir leis an leagan seo. bheith lyophilized.Ina theannta sin, tá sé in ann a ghníomhaíocht a scaoileadh ag teochtaí ardaithe, rud a fhágann go gcuirfear deireadh leis an ngá atá le céim gníomhachtaithe ar leith.
Comhpháirteanna
| Comhpháirt | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polaiméire V2 (saor ó ghliocról) (32U/μL) | 0.05 ml | 0.25 ml | 2.5 mL |
| 10×HC Bst V2 Maolán | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 3×10 mL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 2 × 10 mL |
Feidhmchláir
1.Aimpliú isothermal LAMP
2.imoibriú díláithrithe aonair snáithe DNA
3.Seicheamhú géine ard GC
4.Seicheamh DNA ar leibhéal na nanogram.
Coinníoll Stórála
Iompar faoi 0 ° C agus a stóráil ag -25 ° C ~ -15 ° C.
Sainmhíniú ar an Aonad
Sainmhínítear aonad amháin mar an méid einsím a ionchorpraíonn 25 nmol de dNTP in ábhar dothuaslagtha aigéid i 30 nóiméad ag 65°C.
Imoibriú LAMP
| Comhpháirteanna | 25 μLCóras |
| 10×HC Bst V2 Maolán | 2.5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
| dNTPs (10mM an ceann) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 Glas (25×)a | 1.0 μL |
| Meascán primerb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (saor ó ghliocról) (32 U/uL) | 0.25 μL |
| Teimpléad | × μL |
| ddH₂O | Suas le 25 μL |
Nótaí:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): De réir riachtanas turgnamhacha, is féidir ruaimeanna eile a úsáid mar ionadaigh;
2) b.Meascán primer: faightear trí 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB agus méideanna eile a mheascadh.
Frithghníomh agus Coinníoll
1 × HC Bst V2 Maolán, tá an teocht goir idir 60°C agus 65°C.
Díghníomhú Teasa
80°C, 20 nóiméad.
